A fase móvel é aquela em que os componentes, quando ficam isolados, movem-se por um solvente fluido, que pode ser líquido ou gasoso. A fase estacionária é aquela em que o componente em seu processo de separação ou identificação irá ficar fixo na superfície de outro material líquido ou sólido.
A HPLC utiliza uma fase móvel líquida para separar os componentes da amostra. Os componentes são dissolvidos em um solvente e, em seguida, forçados a passar por uma coluna de alta pressão. Os componentes, então, interagem com a fase estacionária e saem em diferentes momentos, da mesma forma que na cromatografia gasosa.
Para compreender a cromatografia, você precisa saber dois conceitos básicos: Eluição: é a corrida cromatográfica. Eluente: é a fase móvel, um tipo de solvente que vai interagir com as amostras e promover a separação dos componentes.
Significado de Eluente substantivo [Medicina] Substância usada na elução; solvente usado na cromatografia.
O tempo de retenção de um composto não retido (tM ou t0) também é conhecido como tempo de espera. ... Como todos os solutos passam o mesmo tempo na fase móvel, o fator de retenção é uma medida de retenção pela fase estacionária. Parâmetros que influenciam o fator de retenção: Fase estacionária.
A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE ou HPLC) é um método de separação de compostos químicos em solução, para realização desta separação necessitamos no processo cromatográfico da partição dos componentes de nossa amostra entre a fase móvel (FM) e a fase estacionária (FE).
Meça a distância entre o ponto de injeção e a altura máxima do primeiro pico. Multiplique a distância pela velocidade do papel ou do eixo para descobrir o tempo morto.
Em outras palavras, atraso de transporte, ou tempo morto, é o intervalo de tempo entre o instante em que o sistema sofre uma variação qualquer e o instante em que esta começa a ser detectada pelo elemento sensor. Como exemplo veja o caso do controle de temperatura apresentado na Figura 14.
Os principais detectores utilizados em cromatografia de fase líquida, são:
Os componentes de um cromatógrafo líquido são: bomba, coluna cromatográfica, detector e o registrador. É um método utilizado para separação de espécies iônicas ou macromoléculas e compostos termolábeis. A fase móvel da CLAE deve ser um solvente que respeite algumas características impostas por esse método analítico.
A HPLC utiliza uma fase móvel líquida para separar os componentes da amostra. Os componentes são dissolvidos em um solvente e, em seguida, forçados a passar por uma coluna de alta pressão. Os componentes então interagem com a fase estacionária e saem em diferentes momentos, da mesma forma que a cromatografia gasosa.
Os componentes de um cromatógrafo líquido são: bomba, coluna cromatográfica, detector e o registra- dor. É um método utilizado para separação de espéci- es iônicas ou macromoléculas e compostos termolábeis.
A separação é realizada através da distribuição dos componentes da mistura entre 2 fases que estão em contato íntimo. Nos processos cromatográficos estão sempre envolvidas 2 fases (fase móvel e fase estacionária), sendo que uma se locomove através de uma outra. A fase que se move denomina-se fase móvel.
Foi o botânico russo, Mikhail Semenovich Tswett quem inventou a primeira técnica cromatográfica em 1900 durante suas pesquisas sobre a clorofila. Ele usou uma coluna de absorção líquida contendo carbonato de cálcio para separar pigmentos de folhas de plantas.
Mikhail Semenovich Tswett
A cromatografia em papel consiste em uma camada relativamente fina e plana e a fase móvel desloca-se por ação de capilaridade (SKOOG, 2002). Esta separação ou distribuição dos componentes de uma mistura está relacionada com as diferentes solubilidades relativas destes componentes na fase móvel e na fase estacionária.
A cromatografia pode ser utilizada para a identificação de compostos, por comparação com padrões previamente existentes, para a purificação de compostos, separando-se as substâncias indesejáveis e para a separação dos componentes de uma mistura.
A cromatografia gasosa é uma análise muito importante nesse processo, pois é responsável por determinar a concentração de gases dissolvidos no óleo mineral isolante, testar a pureza de substâncias e fazer a separação de componentes de uma mistura.
Esse processo fundamenta-se no fato das substâncias presentes na mistura terem diferentes propriedades e composições, assim, a interação delas com as duas fases imiscíveis (fase estacionária e fase móvel) será diferente também.