O método consiste em tratar sucessivamente um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. As bactéricas que adquirem a coloração azul violeta são chamadas de Gram-positivas e aquelas que adquirem a coloração vermelho são chamadas de Gram-negativas.
A Técnica da Coloração de gram é uma importante ferramenta laboratorial dentro da Microbiologia, auxiliando o laboratório no diagnóstico. A partir de características bioquímicas das bactérias as mesmas podem ser classificadas como gram positiva ou gram negativas, corando-se de roxo ou rosa respectivamente.
Em suma, o procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias retenham a cor com base nas diferenças nas propriedades químicas e físicas da parede celular. De fato, o uso dos corantes permite aumentar o contraste e evidenciar a estrutura bacteriana.
Coloração de Gram. É uma técnica de coloração secular, descrita em 1884 pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, que consiste na preparação de um esfregaço em lâmina de vidro para microscopia, de preferência da porção mais purulenta/sanguinolenta da amostra.
O lugol é o fixador (mordente) usado na coloração do gram, ele faz com que o cristal de violeta seja melhor absorvido pelos flagelos e pela membrana de lipopolissacarídeo das bactérias gram positivas, corando elas de azul. A coloração de gram serve para classificar as bactérias em gram negativo ou positivo.
O lugol é um suplemento iodado a partir da combinação de iodo e iodeto de potássio. Estimula o bom funcionamento da glândula tireoide, melhorando a produção de hormônios, e controla a síntese de estrogênio nos ovários. É uma suplementação segura e eficaz para repor a carência de iodo no organismo.
O primeiro corante utilizado é o cristal violeta, que devido à ligação iônica entre os grupos básicos do corante e os grupos ácidos dos constituintes da membrana celular das bactérias, tanto as gram-positivas quanto as gram-negativas absorvem o corante.
Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina com lugol diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto; 4. Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente; 5. Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não desprenda mais corante; 6.
Resposta. A coloração de Gram é importante pois define se a bactéria é Gram positiva ou Gram negativa. Dessa forma, orienta a escolha das classes e/ou gerações de antibióticos que serão utilizados para o tratamento da infecção em questão.
- Fazer um esfregaço bem homogêneo, fixar pelo calor e esperar esfriar (conforme roteiro de aula prática parte 1); - Cobrir com cristal violeta, e deixar agir por 1 minuto; - Lavar rapidamente com água; - Cobrir com solução de lugol durante 2 minutos; - Lavar em água corrente; - Lavar a lâmina com álcool-acetona até ...