Qual o papel do detergente presente na solução de lise no processo de extração do DNA? A função do detergente é desestruturar as moléculas de lipídios das membranas biológicas. Desta maneira, as membranas sofrem ruptura e todo o conteúdo celular – inclusive o DNA – fica disperso na solução.
É a partir da extração do DNA que os cientistas realizam análises que permitem a detecção de doenças, distúrbios e anomalias genéticas, além da identificação de vírus encontrados no ambiente. O primeiro passo para a extração do DNA é a abertura da célula, por meio da remoção da membrana que a protege.
A extração de DNA é o primeiro passo na utilização de técnicas moleculares. Este processo é parte fundamental para se obter alta eficiência de amplificação nos protocolos que usam a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR).
A proteinase K é indispensável no material sanguíneo devido digerir proteínas e eliminar a contaminação das preparações de ácido nucleico, além de inativar as nucleases que poderiam degradar o DNA ou o RNA durante a purificação.
Dissolver em 50 mM Tris-HCl (pH=7,5), 10 mM CaCl2. Para remoção e inativação de contaminantes protéicos, a concentração de trabalho sugerida é: 50 – 100 µg/mL, e acima de 2 mg/mL para tratamento de tecidos. O pó liofilizado pode ser preparado como solução estoque em água na concentração de 20 mg/mL e estocado em -20°C.
O morango precisa ser macerado para que os produtos químicos utilizados para a extração cheguem mais facilmente em todas as suas células.
A banana é macerada para que os constituintes da solução de lise (água, detergente e cloreto de sódio) atinjam mais facilmente todas as células da fruta. A solução de lise misturada à massa resultante da banana deu origem a uma solução liquefeita da polpa da fruta.