O Sequenciamento de Próxima Geração (NGS, na sigla em inglês) refere-se à aplicação de métodos novos e mais rápidos para sequenciar estruturas de DNA e RNA e que vêm revolucionando a Genômica e a Biologia Molecular.
O sequenciamento de DNA se baseia em equipamentos que leem uma amostra de DNA e geram um arquivo eletrônico. Este arquivo contém símbolos que representam a sequência de bases nitrogenadas – A, C, G, T – presentes na amostra.
Sequenciamento de Nova Geração – NGS
O Sanger sequencia os fragmentos de DNA individualmente, enquanto o NGS é uma técnica de sequenciamento em larga escala, no qual milhões e até bilhões de fragmentos são sequenciados simultaneamente em uma única corrida.
O Sequenciamento de Nova Geração (Next Generation Sequencing – NGS), consiste em um exame que realiza o sequenciamento do genoma humano, sendo capaz de ler grandes fragmentos do DNA, permitindo a identificação de diversas doenças ou modificações genéticas.
A máquina da Ion Torrent deve ser comercializada por cerca de US$ 150 mil. O Ion Proton™ é o sucessor do Ion Personal Genome Machine™, um dos sequenciadores mais vendidos no mundo. A geração anterior de sequenciadores custava entre US$ 500 mil e US$ 750 mil.
Illumina: No sequenciamento baseado em cores, usando Illumina, os fragmentos ligados a adaptadores são distribuídos por chips de leitura onde ocorre a amplificação. A amplificação segue uma dinâmica de formação de "pontes" pela ligação dos adaptadores ao chip, formando assim os "sítios de leitura".
O sequenciamento de DNA é o processo realizado para se determinar a sequência exata de nucleotídeos em uma molécula de DNA (ácido desoxirribonucleico)....Cada tubo contém:
Apesar de o método de Sanger ser utilizado até hoje, novas técnicas têm sido desenvolvidas para o sequenciamento de DNA. A mais recente é o sequenciamento de nova geração, também chamada de sequenciamento de segunda geração ou ainda Next-Generation Sequencing (NGS).
A principal vantagem do método de Sanger é, sem dúvida, o maior tamanho dos reads gerados e a precisão da base gerada (base calling), que tende a ser 10x maior que nos métodos NGS; já para os métodos de segunda geração, a principal vantagem consiste na construção in vitro de bibliotecas genômicas sem amplificação de ...