Meio Seletivo: são exemplos o Ágar Manitol Salgado e Agar SS, utilizados para selecionar as espécies que serão isoladas e impedir o crescimento de germes. Meio Diferencial: promove uma mudança na coloração das colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de microrganismos.
Meios de cultura que apresentem agentes solidificantes são apontados como sólido; Os semi-sólidos possuem uma consistência intermediária, já que são compostos com uma quantidade de ágar e/ou gelatina que varia de 0,075 a 0,5 %; Os que não possuem agentes solidificantes e possuem aparência de caldo, são determinados ...
Principais meios de cultura utilizados e suas aplicações
Os principais componentes de um meio de cultura são fontes de carbono, energia (açúcares), nitrogênio, fósforo e sais minerais.
Quais são os tipo de Meios de cultura?
Alguns meios de cultura
Um meio de cultura pode ser sintético, com componentes definidos quimicamente, ou complexo, quando são adicionadas substâncias provenientes da natureza (extrato de carne, peptona, sangue, entre outras). Quanto ao estado físico, pode ser líquido (caldo) ou sólido (caldo com 1,5% a 2% de ágar).
A função do meio com nutrientes Ágar Sabouraud é o cultivo e crescimento qualitativo de fungos, como filamentoses, leveduras, espécies de cândidas e fungos associados a infecções artificiais.
Preparação: Suspender 65g de pó em 1 litro de água destilada ou deionizada. Aquecer até ferver dissolvendo completamente. Esterilizar em autoclave a 121°C por 15 minutos. Dispensar nos recipientes finais.
Procedimento - Semear o material ou a cultura microbiana com auxílio de uma alça de níquel cromo, fazendo sequências de estrias na superfície do meio de cultura da placa de Petri, como apresentado na figura ao lado. Inicie transferindo o material para o meio (“Esgotamento” Inicial).
Estria Reta: semear com agulha bacteriológica, fazendo uma linha reta, com cuidado de não ferir o Agar, partindo da base para a extremidade do bizel (superfície inclinada do meio). Objetivo: obtenção de pequena massa de microorganismos. Picada Central: semear com agulha bacteriológica, no centro do Agar.
Entre as técnicas de semeadura em microbiologia mais utilizadas, podemos citar a de esgotamento. Nela, a suspensão bacteriana (que é o líquido com o microrganismo) é espalhada de forma aleatória em toda a placa, até que todo o material seja utilizado.
Caso as placas das alíquotas de 0,3 ml apresentem mais de 300 colônias cada uma, conta-se as colônias da placa contendo a alíquota de 0,1 ml e multiplica-se por 100 ou 102. Exemplo 120 colônias multiplicadas por 100 é igual a 12000UFC ou 1,2 X 104 UFC de Staphylococcus aureus por grama ou mililitro da amostra.
Exemplo: Área das placas: 56 cm22 Maior diluição inoculada: 10-3 Quadrado 1: 35 colônias Quadrado 2: 40 colônias Quadrado 3: 32 colônias Quadrado 4: 37 colônias 35 + 40 + 32 + 37 = 144 / 4 = 36 UFC por cm2 36 x 56 x 1.
Amostras com crescimento de microrganismos cuja contagem de colônias foi igual ou superior a 100.
Para efetuar a contagem total de bactérias numa determinada suspensão de amostra faz-se diluições decimais seriadas do espécime e inocula-se, usualmente, em Profundidade ou Incoporação (Pour-Plate) ou pelo método de espalhamento em placa com alça de Drigalsky, em meios de cultura apropriados.
O que é inoculação de microrganismos e o que é um inoculante? A inoculação de microrganismos nada mais é que adicionar microrganismos benéficos às plantas. Esses microrganismos trazem algumas vantagens às culturas como: aumento do crescimento, melhor desenvolvimento e melhora na absorção de nutrientes.
A contagem bacteriana total (CBT) A Contagem Bacteriana Total indica a contaminação bacteriana do leite e reflete a higiene de obtenção e conservação do mesmo. É expressa em unidades formadoras de colônia por mililitro (UFC/mL).
O método de contagem total de microrganismos de alimentos por meio de placas baseia-se no plaqueamento de alíquotas do alimento homogeneizado e de suas diluições, onde é utilizado o meio de cultura Ágar Padrão para Contagem.
A contagem de microrganismos em placas de petri com meios de cultura é um dos métodos mais utilizados em laboratórios, e ajuda a determinar o verdadeiro tamanho de uma população de bactérias.
Métodos Diretos Contagem no microscópio; • Contagens com cultura; Contagem eletrônica.
A determinação do número mais provável (NMP) de coliformes em uma amostra é efetuada a partir de aplicação da técnica de tubos múltiplos. O método parte do pressuposto de que as bactérias presentes em uma amostra podem ser separadas por agitação, resultando em uma suspensão de células, uniformemente distribuídas.
O método do NMP permite calcular o número de um microorganismo específico numa amostra de água, utilizando tabelas de probabilidade. Diluições decimais da amostra são inoculadas em séries de tubos contendo meio líquido selectivo. Os tubos são positivos quando têm crescimento e/ou produção de gás de fermentação.
Foram aplicadas duas metodologias oficiais para detecção de Coliformes totais Escherichia coli. Utilizou-se o meio Ágar Vermelho Violeta Bile Lactose (VRBA), seguidas de provas confirmativas e o sistema Petrifilm EC, sendo respectivamente fabricado pelas empresas Oxoid e 3M.
O que são coliformes termotolerantes (fecais)? São bactérias que apresentam a capacidade de utilizar a lactose como nutriente, produzindo gás a temperatura de 44-45,5 ºC. Sendo que 90% de Escherichia coli correspondem a este grupo.
Coliformes são grupos de bactérias indicadoras de contaminação e são formados pelos gêneros Escherichia, Citrobacter, Enterobacter e Klebsiella. ... Há também os Coliformes Fecais, também chamados de Coliformes Termotolerantes pois toleram temperaturas acima de 40ºC e reproduzem-se nessa temperatura em menos de 24 horas.