É a capacidade de uma metodologia analítica demonstrar que os resultados obtidos são diretamente proporcionais à concentração do analito na amostra, dentro de um intervalo especificado. Recomenda-se que a linearidade seja determinada pela análise de, no mínimo, 5 concentrações diferentes.
A linearidade da curva de calibração, é determinada pelo ensaio de amostras que possuem concentrações de analito dentro da faixa de trabalho pretendida. A curva de calibração é muitas vezes dada apenas pela faixa linear da curva que relaciona a resposta ou sinal com a quantidade ou concentração do analito.
.::Como criar uma curva de calibração ABS no Excel::.
Clique com o botão direito do mouse em um dos pontos e selecione a opção “Adicionar linha de tendência”. Uma linha reta aparecerá no gráfico. No lado direito da tela, o menu “Format Trendline” aparecerá. Marque as caixas ao lado de “Exibir equação no gráfico” e “Exibir valor do quadrado R no gráfico”.
A curva-padrão corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância (A) e os de concentração. Com base na análise gráfica é possível verificar a linearidade da reação e calcular um fator de conversão de valores de absorbância em concentração.
A curva de calibração, por sua vez, corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e os de concentração de uma determinada substância. Através do gráfico é possível verificar a linearidade da reação e calcular um fator de conversão de valores de absorbância em concentração.
Fator de calibração = Valor determinado pelo equipamento a partir de materiais calibradores e que servirá de base para cálculo dos resultados. Calibrador = Material que irá transferir exatidão ao método.
A Lei de Beer estabelece uma relação linear entre a absorbância e a concentração da amostra, sendo portanto, possível determinar a concentração de uma amostra através de sua curva de calibração (absorbância versus concentração). com a potência radiante transmitida na presença destas espécies.
A absorbância de uma solução está relacionada com a transmitância. Quando a absorbância de uma solução aumenta, a transmitância diminui. Transmitância e absorbância tendem a ser grandezas complementares. Assim, sua soma (para a mesma energia e comprimento de onda incidente) é aproximadamente igual a 1, ou 100%.
- Para radiações monocromática, a absorbância (A) é diretamente proporcional ao comprimento do caminho óptico (b) através do meio e a concentração (c) das espécies absorventes. A constante de proporcionalidade, chamada de absortividade molar (ε).
A absortividade também pode ser calculada usando-se a razão entre a intensidade de uma amostra referencial e a amostra desconhecida. Ela é dada pela equação A = log10(l0/l). A intensidade deve ser obtida com o uso de um espectrofotômetro.
A equação deve estar na forma y = mx + b. Portanto, se você subtrair o intercepto em y da absorvância e dividir pela inclinação, estará encontrando a concentração da sua amostra.
Seu cálculo é feito dividindo-se a quantidade de matéria ou substância (mol) pelo volume da solução, conforme a expressão matemática abaixo:
é a intensidade da luz antes que entre na amostra (intensidade da luz incidente)....Absorbância e transmitância.