Didaticamente, o processo de replicação do DNA pode ser dividido em três etapas: iniciação, alongamento e terminação. A iniciação é considerada a única fase regulada da replicação do DNA, e visa assegurar que o DNA seja replicado somente uma vez por ciclo celular.
Como ocorre a síntese proteica? A síntese proteica ocorrerá por meio de um processo de tradução, no qual a informação presente no RNAm, uma sequência de nucleotídeos, será traduzida numa sequência de aminoácidos, que dará origem a um polipeptídeo (proteína).
No processo de replicação do DNA várias enzimas estão envolvidas, como a DNA-polimerase, helicases, proteínas SSB, ligases, topoisomerases e primase. As helicases são enzimas com função de quebrar as pontes de hidrogênio entre as bases, para que as duas fitas de DNA se separem.
DNA Polimerase
DNA Helicase : A função da DNA helicase é reconhecer a origem de replicação e desenrolar a dupla-hélice de DNA, na forquilha de replicação. ... São também essenciais na reparação e recombinação de DNA. DNA polimerase : enzima que catalisa a formação de cadeias de DNA usando as cadeias separadas como molde.
Os fragmentos de DNA que compõem a fita de DNA com replicação descontínua são chamados de Fragmentos de OKazaki. NA polimerase especial, denominada de polimerase de reparo, faz a ligação entre os dessoxirribonucleotídeos complementares á região antes ocupada pelo primer.
A DNA Polimerase III (Poll III) é um enzima de replicação do DNA, que realiza a adição de nucleotídeos ao DNA em síntese, responsável principalmente pelo processo de replicação do material genético em Escherichia coli.
A ADN ligase ou DNA ligase é uma enzima que possui como função facilitar a união de cadeias de DNA, catalisando a formação de uma ligação fosfodiéster. É a enzima responsável por unir covalentemente os fragmentos de Okazaki após a retirada dos iniciadores pela DNA polimerase.
A duplicação é semiconservativa, pois cada molécula nova de DNA apresenta uma fita da molécula que serviu como molde.
Primase é uma enzima RNA polimerase que atua na replicação de DNA. Essa enzima sintetiza um segmento curto de RNA, cerca de 10 nucleotídeos, complementar a uma fita de DNA.
As polimerases do RNA são enzimas que catalisam a síntese de RNA tendo como molde uma fita de DNA. Esse processo é denominado de transcrição. Ao contrário das DNA polimerases, as polimerases do RNA são capazes de iniciar uma nova cadeia de RNA a partir de um molde de DNA, sem precisar de iniciador (primer).
Nossa meta na clonagem é inserir um gene alvo (p.e., para insulina humana) num plasmídeo. Usando uma enzima de restrição cuidadosamente escolhida, digerimos: O plasmídeo, que tem um único local de corte. O fragmento do gene alvo, que tem um sítio de restrição (de corte) próximo a cada extremidade.
A clonagem molecular é uma técnica da engenharia genética conhecida também por DNA recombinante, clonagem gênica ou manipulação gênica. Essa tecnologia permite pegar um “pedaço” do DNA e combiná-lo com outro, produzindo muitas cópias de diferentes combinações genéticas.
A tecnologia do DNA recombinante é também conhecida como clonagem molecular ou mesmo clonagem gênica. Trata-se de processos de transferência de DNA de um organismo para outro visando produzir benfeitorias.
O DNA recombinante aparece na mistura do gene de interesse humano com o plasmídeo bacteriano. Ambos são colocados na mesma solução com uma enzima que vai acoplar o DNA humano ao DNA da bactéria.