Procedimento
O gel de agarose é a matriz na qual é aplicada a amostra e que permite realizar a separação dessas moléculas. ... Os géis de baixa percentagem de agarose são relativamente rígido e fáceis de manipular, sendo usados para separa moléculas grandes como o DNA e o RNA, proteínas e complexos proteicos muito grandes.
A eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. ... A eletroforese normalmente é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA.
A eletroforese é muito utilizada e tem papel importante na análise laboratorial e também em pesquisas científicas. Essa técnica foi empregada pela primeira vez em 1937 pelo bioquímico Arne Tisélius e permite realizar a separação de macromoléculas como DNA, RNA, proteínas e enzimas com tamanhos e cargas diferentes.
O brometo de etídio (EtBr) é um corante que está presente em quase todos os laboratórios de Biologia Molecular. Isso porque como característica principal ele consegue se intercalar entre os pares de base do DNA , tornando possível a sua visualização através da emissão de fluorescência sob a luz ultravioleta.
Eletroforese refere-se à migração de partículas ou solutos eletricamente carregados em um meio líquido sob a influência de um campo elétrico.
O ágar-ágar, também conhecido simplesmente como ágar ou agarose, é um hidrocolóide fortemente gelatinoso extraído de diversos gêneros e espécies de algas marinhas vermelhas que consiste em uma mistura heterogênea de dois polissacarídeos, agarose e agaropectina.
ácido desoxirribonucleico. RNA: Apenas uma fita composta por bases nitrogenadas ( adenina, guanina, citosina e uracila), fosfato. ... Na cadeia polinucleotídica, os nucleotídeos encontram-se na forma monofosfatada: esse grupo fosfato, que permite as ligações fosfodiéster entre os nucleotídeos, tem uma carga negativa.
A técnica de separação dos fragmentos de DNA mais utilizada é a eletroforese através de géis de agarose.
Em altas temperaturas ou pH extremos o DNA sofre desnaturação, isto porque ocorre ruptura das pontes de hidrogênio entre os pares de bases. ... A absorbância também aumenta com o aumento da temperatura, desnaturando a molécula.
As moléculas de DNA têm carga negativa devido aos grupos fosfato em seus esqueletos de açúcar-fosfato, assim elas começam a se mover através da matriz de gel, para o polo positivo.