O teste de pirogênio in vivo fundamenta-se na observação da resposta fe- bril em coelhos, após injeção intravenosa da solução em análise, na qual se mede a temperatura retal dos animais a intervalos de 30 minutos, por um período de 3 horas.
Conforme descrito na Farmacopéia Brasileira 5º edição o teste de pirogênios fundamenta-se na medida do aumento da temperatura corporal de coelhos, após injeção intravenosa da solução estéril em análise.
Esta mistura é incubada a 37ºC durante 1 hora. O ponto final da reação é verificado através da inversão dos tubos a 180º, sendo que a presença do gel que se mantém sólido durante a inversão é considerado positivo para a presença de endotoxinas.
O ensaio de lisado de amebócitos de Limulus é recomendado pelas empresas farmacêuticas internacionais como método de determinação de toxinas bacterianas tanto em matérias-primas utilizadas para produção de medicamentos como para testar produtos finais.
De acordo com o Projeto Esperança Animal, PEA, pode-se conceituar: ... "Testes em Animais: Todo e qualquer experimento com animais cuja finalidade é a obtenção de um resultado seja de comportamento, medicamento, cosmético ou ação de substâncias químicas em geral.
O método mais comum para remover as endotoxinas das dissoluções de fármacos parentéricos é a filtração. As endotoxinas bacterianas são lipopolissacarídeos que são encontrados em diferentes tipos de estados de agregação como contaminantes: em forma de vesículas, de micelas ou do tipo detergente, solúveis.
Portanto, os testes para a detecção de pirogênio são ensaios de segurança toxicológicos imprescindíveis tanto nas etapas de produção quanto no controle da qualidade de produtos injetáveis, garantindo a segurança do uso desses produtos e evitando efeitos adversos à saúde1 , 2 , 3.
Portanto, os testes para a detecção de pirogênio são ensaios de segurança toxicológicos imprescindíveis tanto nas etapas de produção quanto no controle da qualidade de produtos injetáveis, garantindo a segurança do uso desses produtos e evitando efeitos adversos à saúde1 , 2 , 3.
O método LAL (Lisado de amebócitos de Limulus) substituiu o ensaio de pirogênios que se realizava utilizando coelhos, tanto em experiências que ocorrem em pesquisas, como na indústria farmacêutica, alimentícia e outras, quando se quer comprovar o conteúdo de endotoxinas que existe em uma amostra.
As toxinas bacterianas são substâncias que alteram o metabolismo normal das células hospedeiras e são classificadas em exotoxinas (produzidas pelas bactérias gram-positivas, sendo liberadas com a lise das mesmas) e endotoxinas (produzidas pelas bactérias gram-negativas e atuam como toxinas em circunstâncias especiais).